捕蝇草又名苍蝇夹,是食虫植物茅膏菜科内的捕蝇草属,为多年生草本。植株秀丽别致,它能散发出对昆虫有诱惑性的芳香,可引诱昆虫前来并捕抓,而后由叶面的紫红色腺体分泌消化液将昆虫分解并吸收,是一种很有趣的小型食虫植物。在欧美常用来盆栽观赏。由于捕蝇草有一对可开合的捕虫叶片,具有十分明显的捕虫特征,且叶色鲜红,是优良的珍奇观赏花卉及学校生物课的植物活教材,因此十分受欢迎被广泛栽培,目前美国、荷兰等国均已产业化生产供应市场。
捕蝇草常规用叶片扦插,子芽分植等无性方法繁殖。由于叶片扦插成活率低,植株萌芽能力较差,满足不了市场的需求,而应用组培技术可以较快获得大量的幼苗。目前,国内有关捕蝇草组织培养研究报道较少,本文通过试验实践,总结出了一套捕蝇草的实用组培快繁技术,并在企业形成规模化生产,品质良好,产品出口到荷兰,取得较好的经济效益。
1 试验材料和方法
取荷兰来捕蝇草的种子,用自来水清洗干净,后用70%的酒精浸润约0.5 min,无菌水冲洗2~3次。用0.1%升汞消毒0.5~1 min,无菌水冲洗3~5次,滤干水后接种至MS+6-BA 0.1 mg/L的培养基中。约30天后出现愈伤组织,将愈伤组织接种至1/2MS的培养基中,经30天后出现丛状小芽,丛状小芽分切成2~3个芽/团继代培养。
以上培养基均含蔗糖3%,卡拉胶0.75%,pH值5.5,培养温度22~24℃,光照10~12 h/天,光强1 500~2 000 lx。
2 结果与分析
2.1 愈伤组织的诱导
将备好的种子5个一团为1个增殖单位接种到诱导愈伤试验培养基中。共4个处理。基本培养基为MS,每升分别添加细胞分裂素2IP 0.3 mg、6-KT 0.3 mg、6-BA 0.1 mg、6-BA 0.3 mg。根据观察,试验结果如下:捕蝇草种子对三种细胞分裂素均敏感,但KT和2ip形成愈伤比率稍低,且KT有少量玻璃化现象。而6-BA又以0.1 mg/L为好,所形成愈伤比例较高且无玻璃化现象,质量好。含6-BA 0.3 mg/L的培养基虽形成愈伤比率高,但其愈伤呈现很高比例的玻璃化,质量不好。因此,愈伤组织诱导以MS添加细胞分裂素6-BA 0.1 mg/L培养基好。
2.2 芽的诱导
把愈伤组织分成约0.3 cm大小的块状,分别接入以下诱导芽的试验培养基中,共9个处理。三个处理基本培养基为MS,每升分别添加细胞分裂素0、2IP 0.05 mg、6-KT 0.05 mg。三个处理基本培养基为1/2MS,添加细胞分裂素同上。另三个处理基本培养基为1/8MS,添加细胞分裂素也同上。根据观察,试验结果如下:以MS为基本培养基的愈伤组织都有玻璃化现象,添加了细胞分裂素的更严重。以1/8MS为基本培养基的愈伤组织都有死亡现象,添加了细胞分裂素的还有玻璃化现象。以1/2MS为基本培养基未添加细胞分裂素的愈伤组织正常,诱导的小芽多且生长好,植株挺拔。但添加了细胞分裂素的有玻璃化现象。综上分析,愈伤诱导芽的培养1/2MS基本培养基优于MS和1/8MS两种基本培养基,又以1/2MS基本培养基且不添加任何细胞分裂素为很佳。
2.3 芽的增殖
将诱导出的小芽丛分成2~3个芽/团,转入各增殖试验培养基中,共8个处理。基本培养基四个处理为1/2MS,另四个处理为1/8MS。每升分别添加细胞分裂素2IP 0.01 mg、2IP 0.03 mg、6-KT 0.01 mg、6-BA 0.01 mg和生长素IAA 0.01 mg.以40天为一个周期续代一次可产生3~5个子芽。根据观察:用1/2MS为基本培养基的处理芽团表现叶色绿,子芽多且植株高大粗壮,长势好。用1/8MS为基本培养基的处理芽团表现叶色颜色鲜红,但子芽较少且植株偏矮小,长势较差。细胞分裂素中以添加2ip 0.03为很好,用6-BA和6-KT虽然子芽多,但会导致叶片皱缩不舒展且叶片明显缩小,表现不正常。综上分析,1/2MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L处理培养基用于芽团在增殖扩繁很好,芽多苗大且无皱缩芽,但叶片虽大颜色却偏绿,而客户要求是苗大且叶片颜色鲜红。尝试在续代过程中用两次1/2MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L的培养基后再用一次1/8MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L的培养基,达到了很好的效果:苗高大舒展,叶片又呈现鲜艳的红色,客户非常满意。
2.4 根的诱导
将芽团中H>1.2 cm的粗壮单芽挑下,去除边缘黑褐叶片接入四种生根试验培养基中,培养基的基本母液为1/8MS,每升分别添加IAA 0.01,IAA 0.03,NAA 0.01,NAA 0.03和活性碳200 mg。经观察,以每升添加IAA 0.03和活性碳200 mg的培养基为很佳。7~10天后根就开始萌动,20天后有100%的苗都生出2~3条长约0.5 cm的根,而且芽苗舒展,叶大色红。
3 移植
将已生根的小苗放入荫棚内炼苗10~15天,使其适应自然环境后将小苗从培养器皿中取出,洗去培养基移栽入1/3椰糠+2/3泥炭土的基质中,注意保温保湿,小苗很快正常生长,成活率85%以上。
4 结语
1)在捕蝇草的组织培养中诱导愈伤以MS+6-BA 0.1 mg/L为好。从愈伤中诱导出芽以1/2MS不添加任何细胞分裂素为很佳。
2)在捕蝇草的继代培养中,为保证生产出高大舒展,叶片又呈现鲜艳红色的苗。采用两种不同基本母液的培养基交替使用,达到了很好的效果。
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