矾根可以通过叶插进行繁殖，虽然可以大规模繁殖，但成株慢，很难长叶长芽，成活率低。其次，还可以通过播种和分株繁殖，但是都耗时长，难度大，给大规模繁殖造成困难。为加快矾根的繁殖速度和质量，更好的满足生产需求,对此采用植物组培快繁技术进行研究，可以在短时间内可以实现植株大量繁殖，对于“名,优,特,新,稀”等植物品种的繁殖有巨大的意义,进而可以解决国内市场矾根数量少，引进价格贵的问题，并为矾根大规模生产提供理论依据和参考价值。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验于2016年8月引进矾根“狂野”(Heuchera micrantha ‘Rave On’),“莱姆里奇”(Heuchera micrantha ‘Lime Rickey’),“黄桃派”(Heuchera micrantha ‘Peach Pie’)和“乔治亚桃子”(Heuchera micrantha ‘Georgia Peach’)四个品种栽种于安康学院江北校区温室大棚内，栽培基质采用营养土∶黄泥土∶沙土=1∶1∶1,棚内温度控制在15 ℃～30 ℃之间，期间保持空气湿度50%～80%，基质含水量在50%左右。组培试验于2017年4月采集四个矾根茎段作为组培快繁的外植体材料。
1.2 试验方法
1.2.1 矾根初代培养诱导试验设计从日光温室里种植的四种矾根植株上选取生长健康的茎段作为外植体。用流水冲洗干净，将外植体转入超净工作台，用75%酒精清洗30 s，用无菌水清洗3次后备用。以MS为培养基，添加3种不同激素配方进行培养，共12个处理。接种后置于已灭菌的培养室培养，培养条件温度在25±2 ℃之间，空气相对湿度55%左右。
1.2.2 矾根继代培养试验设计选取初代很佳配方培养四种矾根茎段30 d后，以MS为基本培养基，添加3种不同配方的培养基对进行培养，每个处理接种30瓶，共12个处理，30 d后统计出芽个数计算其增殖系数，确定很佳继代培养基的激素配方，培养条件同前。
1.2.3 矾根生根培养基的筛选及炼苗方法选取出芽较好的矾根组培苗，接种于1/2 MS+IBA 1.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1培养基上，培养条件同前。30 d后调查其株高，叶片数，发根数根长等指标。
移栽前，在组培室内去掉培养瓶的盖子3 d后，将组培苗从瓶内取出，洗去根部的琼脂培养基，将其移入泥炭和珍珠岩为1:1的基质中，进行移栽后的养护管理。
1.3 统计方法
采用随机抽样法，抽取3组，每组3瓶，统计计算每个品种的诱导率，增殖系数，生根率，叶片数，株高，根数和根长，其中诱导率、增殖系数和生根率指标计算方法如下：
诱导率=诱导成功的矾根茎段总数/接种的矾根茎段总数×100%
增殖系数=组培苗在一个周期内形成的有效芽数/接种块数×100%(有效苗数为带3～4片叶的小苗)
生根率=生根的矾根总数/接种的总苗数×100%
试验数据采用EXCEL 2013和SPSS 19软件进行统计分析。
2 结果分析
2.1 四种矾根初代培养诱导试验结果
四种矾根材料取茎段以MS为培养基，添加3种不同激素浓度配方进行培养。接种30 d后，统计其不同品种在不同激素配方条件下的愈伤组织诱导率，结果见表1。
表1 不同激素配方对四种矾根初代培养诱导率的影响
注：A品种名为“狂野”,B品种名为“莱姆里奇”,C品种名为“黄桃派”，D品种名为“乔治亚桃子”，下同。
采用双因素有重复试验设计利用EXCEL进行统计分析，对表1试验结果进行分析，四个品种在不同激素配方条件下的诱导率差异不显著，而不同激素配方对四个品种的影响达到极显著差异，两因素互作差异不显著。统计分析结果中6-BA0.5 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1的诱导效果很好，四个品种的平均诱导率达到84.05%，可作为诱导四个品种的愈伤组织诱导的很佳培养配方。诱导结果如图1。
2.2 四种矾根继代培养试验结果
将初代培养获得的愈伤组织转入添加不同激素配方的继代培养基中培养30 d，对不同激素配方下的四种矾根品种的增殖系数进行统计分析，确定继代培养基适宜的激素配方，结果见表2。
图1 四个矾根品种愈伤组织诱导情况
表2 不同激素配方对四种矾根继代培养增殖系数的影响
图2 四个矾根品种继代培养诱导率情况
统计分析结果发现，品种与激素之间的互作差异显著，进一步分析两因素的互作效应，其中B品种莱姆里奇采用6-BA0.2 mg·L-1 +NAA 0.05 mg·L-1的诱导率最高，可达5.83，C品种“黄桃派”采用6-BA0.2 mg·L-1 +NAA0.01 mg·L-1的诱导效果最差，分析结果见图3。
图3 继代培养不同激素配方与矾根品种间增殖系数互作效应结果
2.3 四种矾根生根培养试验结果
将丛生芽发出较好的的四个品种切分为带3-4片叶的芽簇，接入1/2 MS+IBA 1.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1培养基内进行培养30 d后四个不同品种生根情况见图4。
图4 四个矾根品种组培生根诱导情况
对四个品种的生根等生理指标进行调查统计，结果见表3。表3结果表明，四个品种在1/2 MS+IBA 1.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1生根率、平均叶片数、平均发根数、株高、根长等有一定差异，其中品种B 莱姆里奇除根长外，其它指标均为很佳，表明此品种采用1/2 MS+IBA 1.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1效果很好。
表3 四个矾根品种组培生根诱导情况
3 讨论
3.1 不同激素配方对矾根愈伤组织诱导的影响
以矾根带茎尖幼嫩茎段为外植体，以MS为基本培养基，研究了不同激素配比条件下矾根的组织培养与快速繁殖技术。结果表明：适宜的诱导培养基为MS+6-BA0.5 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1。以柔毛矾根‘香茅’和‘饴糖’为试材，对其组培快繁技术进行系统研究。结果表明：以温室采集的芽作为外植体较适宜;初代培养很佳培养基配方为MS+6-BA0.2 mg·L-1本实验与之不同的是NAA含量不同，因为试验中预备试验中NAA达到0.2 mg·L-1时仍未诱导成功后将NAA含量调高至0.5 mg·L-1，6-BA和NAA为1:1的比例，试验结果显示，矾根“狂野”、“莱姆里奇”、“黄桃派”和“乔治亚桃子”诱导率均为良好。
3.2 不同激素配方对矾根增殖系数的影响
以柔毛矾根‘香茅’和‘饴糖’为试材，其增殖系数最低可达6.2以上，与本试验差异较大，其原因为统计方法不同。由于矾根丛生芽多，试验按照每株3～4个芽为一株，故统计结果远小于王晶的试验结果，且本试验所采用的激素配方与其试验也有很大不同，原因可能与矾根不同品种和不同外植体有关，可以作更进一步的探究。
3.3 不同培养基对矾根生根诱导的影响
王晶[4]等以柔毛矾根‘香茅’和‘饴糖’为试材，对其组培快繁技术进行系统研究，生根阶段的很佳培养基为1/2MS+IBA1.5 mg·L-1。孟清秀为加快矾根的繁殖速度和质量，更好的满足生产需求，以‘瀑布’、‘饴糖’、‘紫色宫殿’3个矾根品种的茎尖为外植体，以MS培养基研究了不同激素配比条件下矾根的组织培养快繁技术，‘瀑布’、‘饴糖’、‘紫色宫殿’的很佳生根培养基为1/2MS+NAA0.3 mg·L-1+AC1.0 g·L-1。本试验前期也试着用上述激素配方做预备试验，但结果均不理想。本次试验采用1/2 MS+IBA 1.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1虽诱导出根，但未必为很佳培养方案，可在后继做进一步研究。
4 结论
研究针对四种矾根材料开展组培快繁技术研究，其结果为6-BA0.5 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1的诱导效果很好，四个品种的平均诱导率达到84.05%，可作为诱导四个品种的愈伤组织诱导的很佳培养配方;采用不同激素配方对四个品种增殖情况诱导结果表明：品种间差异存在显著差异，其中B品种“莱姆里奇”增殖系数最高，平均可达3.48，不同激素配方间差异显著，其中采用6-BA0.2 mg·L-1 +NAA0.05 mg·L-1的诱导率达4.2，效果很好，生根培养基配方为1/2 MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1四个品种平均诱导率可达74.13%。
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