金线莲组培快繁技术研究

金线莲为兰科开唇兰属植物，具有极高的观赏价值和药用价值，是我国民间一种重要的中草药资源，在福建、台湾等地应用的历史十分悠久。由于野生金线莲的自然繁殖率较低，加上人为的大量采挖，造成国内的野生金线莲几近枯绝。因此，通过人工栽培，特别是采用组织培养技术对金线莲进行繁殖，是保护其资源的有效手段。本试验旨在寻求一条高效率、低成本、环保的规模化生产途径，努力为金线莲的产业化提供技术保障。

  1 材料与方法

  1.1 供试材料

  福建金线莲，采用福建漳州地区品种，组培苗。

  1.2 试验方法

  本试验在濮阳市农业科学院组培实验室进行，采用的诱导、增殖基本培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L，pH值5.8;促根基本培养基为1/2 MS+蔗糖15 g/L+琼脂 8 g/L，pH 值 5.8。 控制温度(25±1)℃，光照时间 8～10 h/d，光照强度 1 500～2 000 lx。

  1.2.1 不定芽的诱导和增殖 生长健壮的金线莲，去根部、叶片后切成带有1个腋芽或顶芽的茎段，接种到不同激素水平的MS培养基中培养，共设置8个处理(见表1)。每个处理接种10瓶，每瓶5个茎段，诱导过程中低光照(500～600 lx)，60 d后观察比较不定芽诱导效果及增殖效果，筛选出佳的分化培养基。

  1.2.2 生根诱导 不定芽伸长至3～4 cm时，自基部切下，接种到生根培养基上，共设置6个处理(见表2)，每个处理接种10瓶，每瓶5个不定芽。30 d后，观察其生根状况，筛选出佳的生根培养基。

  1.2.3 组培苗移栽 幼苗在生根培养基上培养35～50 d，根长至3～4 cm时，将瓶苗搬到炼苗大棚或阴凉通风处。经7 d左右的适应性炼苗，便洗苗移栽。移栽基质为蛭石、草炭土、消毒园土按1∶1∶1的比例配制，并用l%～2%多菌灵喷淋消毒。

  2 结果与分析

  2.1 不定芽诱导及增殖试验

  茎段和顶芽接种到不同激素配比培养基中，10～15 d后茎段叶腋处开始分化出可观察到的乳白色的不定芽，顶芽较腋芽更容易萌动，腋芽以丛生生长为主，顶芽则以伸长生长为主。

  试验结果表明 (见表1)，芽体的分化与6-BA、NAA浓度有密切关系，一定浓度的6-BA、NAA对茎段和顶芽有促进分化和增殖的作用。在试验的8个处理中，处理1、处理2、处理3和处理6的分化率均达到100%，且芽体生长状况好，其中处理2(6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L)增殖系数大。

  表1 不同激素浓度对不定芽分化的影响

 2.2 生根诱导试验

  通过分析3个激素水平对金线莲的促根结果可知(见表2)，当NAA浓度为0.5 mg/L时促根效果比较好，生根率、根的数量和长度都达到较高的水平。接种到生根培养基后培养10 d左右开始生根，根从靠近培养基的节上长出1～3条，呈肉质状。根比较短且不分支，其上有细密、乳白色的根毛。活性炭可以提早生根，提高生根率，提高根的质量。加0.3%的活性炭可以使金线莲的生根时间缩短3～5 d，生根率可以提高10%左右，同时可以有效地减缓根的老化。培养50 d左右，植株长至8 cm时可进行室外移栽。

  表2 不同激素对生根的影响

  2.3 组培苗移栽

  炼苗后进行洗苗移栽，移栽后的管理非常重要，每天都要观察，及时补充水分及养分，发现有异常及时处理。把金线莲移至阴凉大棚内的专用花盆中，每盆栽植20株左右，大棚内温度控制在20℃～28℃，使空气相对湿度保持在70%～80%;以后每7 d喷1次1/4MS来补充养分;如遇有猝倒病则喷施多菌灵或托布津1 000倍液，3个月培养期后出苗，选择根壮叶繁的15 cm高优良苗，采后用清水洗净，用专用保鲜盒保藏于冰柜中或晒干成品。

  3 结论与讨论

  (1)金线莲属阴性植物，性喜温凉，在组培过程中，室内温度在23℃左右时长势很好，当气温超过28℃或低于18℃时，其生长会受抑制;而气温超过35℃时，会因蒸腾失水严重而死亡。

  (2)在不定芽诱导和继代增殖前期用微光培养，有利于金线莲芽的分化，在增殖后期适当增强光照，会使芽体较粗壮，生根过程中加强光照，能提高苗的质量。

  (3)试验表明，一定浓度的6-BA、NAA对茎段和顶芽有促进分化和增殖的作用。其中6-BA 1mg/L+NAA 0.1 mg/L、6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L 处理对福建金线莲的不定芽诱导效果较好，分化率均达到100%，且芽体生长状况好。6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L处理对福建金线莲不定芽增殖效果好，增殖系数达到6.14。在生根培养中，NAA 0.5 mg/L+活性炭0.3%处理的促根效果好，生根率可达98%。