广义的组织培养,不仅包括在无菌条件下利用人工培养基对植物组织的培养,而且包括对原生质体、悬浮细胞和植物器官的培养。组织培养的这一涵义具体表现在以下几个方面...
1.组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的,外植体、培养基和培养容器等都须经过灭菌处理,各项操作都须在无菌环境中进行。
2.组织培养在多数情况下是利用成分完全确定的人工培养基进行的,除了少数特殊情况(例如进行营养缺陷型突变细胞的筛选),培养基中包含了植物生长所需的水分和一切大量元素、微量元素、有机物和植物激素。培养基的pH和渗透压也是人为设定的。因此,在组织培养中的植物材料不须依靠自身的光合作用制造养分,而是处于异养状态。
3,组织培养的起始材料可以是植物的器官、组织,也可以是单个的细胞,它们都是处于离体状态下。
4.组织培养的目的是最终实现细胞的全能性。全能性不仅表现在二倍体细胞,也表现在单倍体细胞(如小孢子)和三倍体细胞(胚乳),即使是去掉了细胞壁的细胞(原生质体),在组织培养条件下也能再生完整植株。组织培养物通过连续继代培养可以不断增殖,形成克隆;通过改变培养基成分,特别是其中激素的种类和配比,还可调控培养物的状态和发育方向,达到不同的实验目的。因此,植物激素或植物生长调节物质在组织培养中起着至关重要的作用。
6.组织培养是在封闭的容器中进行的,容器内气体和环境气体通过瓶塞其他封口材料可以进行交换,但水分不易散失,容器内的相对湿度通常情况下乎是100%,因此组培苗叶片表面一般都缺乏角质层或蜡质层,而且气孔保卫胞不具正常功能,气孔始终都是张开的。
7.组织培养中的环境温度、光照强度和光照时间等都是人工设定的,找出这些物理因素的最适合参数对于组织培养的成功也很重要。